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ABIzol Reagent(总RNA提取试剂)-50ml
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ABIzol Reagent(总RNA提取试剂)-50ml
  • 商品货号:AB2001
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  • 商品品牌:北京艾比根
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  • 市场价:¥350
    本店价:¥227
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商品描述:

商品属性

 

ABIzolTM  Reagent(总RNA提试剂)
 
 

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产品编号:AB2001

产品包装:50ml

产品价格:350

 
 
适用范围:
适用于各种动植物组织/细胞总RNA、DNA、蛋白的快速抽提
产品储存:
ABIzolTM Reagent 在室温下能稳定保存12个月。尽管如此,为达到最佳效果,我们建议保存在2~8°C的环境下。
重要提示:
有毒物接触皮肤或者不慎吞服,会导致灼伤。一旦接触皮肤后立即以大量的洗涤剂和清水清洗。若感不适,看医生并寻求苯酚和其他成分的正确治疗方案。
产品介绍:
ABIzolTM Reagent试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入氯仿后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。在除去水样层后,样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。共纯化DNA对于样品间标准化RNA的产量十分有用。
无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。ABIzolTM Reagent试剂操作上的简单性允许同时处理多个的样品。所有的操作可以在一小时内完成。ABIzolTM Reagent抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染。故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。如果是用于PCR,当两条引物位于单一外显子内时,建议用扩增级的DNase I来处理抽提的总RNA。
ABIzolTM Reagent试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色,可见许多介于7 kb和15 kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分),两条优势核糖体~5 kb (28S)和~2 kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。
注意事项:
1. 当ABIzolTM Reagent用量少于2ml时建议使用清洁的一次性的聚丙材质试管。
2. 当ABIzolTM Reagent用量较大时,可以使用玻璃试管(Corex)或聚丙材质试管,事先检验以确保该试管可以耐受加入ABIzolTM Reagent 和氯仿后12,000×g的离心力。不可使用有裂缝或者破损的试管。
3. 离心前小心平衡试管。
4. 离心前玻璃管口必须盖上铝箔并用石蜡膜封口,聚丙烯管必须盖紧。
5. 从少量的组织(1~10mg)或细胞(102~104)中分离RNA样品:往组织或细胞中加入800µl ABIzolTM Reagent。待样品裂解后,加入氯仿并进行步骤2中的抽提操作。在用异丙醇沉淀RNA之前,加入5~10μg无RNA酶的glycogen作为水样层的载体。为降低其黏度在加入氯仿前用26号注射器抽吸两次以切断基因组DNA。Glycogen会留在水样层中并和RNA共析出。在浓缩到4mg/ml之前它不会抑制逆转录反应第一链的合成也不会抑制PCR。
6. 在匀化后和加入氯仿之前,样品可以在–60~–70°C保存至少一个月。RNA沉淀(步骤4,RNA漂洗)溶于75%的乙醇在2~8°C至少可以保存一周,在–5~–20°C下至少可保存一年。
7. 台式离心机最大能达到2,600×g的离心力,如果将离心时间延长到30~60分钟可以满足步骤2和步骤3中的操作。

 

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